色譜定量分析，顧名思義(yi) 就是色譜分析方法來測定組分的含量，主要分為(wei) 麵積百分比法、歸一化法、外標法、內(nei) 標法和標準加入法，色譜定量分析首先需要明確的概念是響應因子，不同的化合物在檢測器的響應是不一樣的，簡單地舉(ju) 個(ge) 例子說，相同濃度的化合物A和B，相同的進樣量，得到的峰高和峰麵積不一定一樣的，響應因子的計算式如下：
式中，w為(wei) 化合物的含量，A為(wei) 響應值，一般為(wei) 峰麵積或峰高，以峰麵積為(wei) 例。由於(yu) 不同的化合物在同一個(ge) 檢測器的響應因子不同，甚至同一個(ge) 化合物不同濃度在同一檢測器的響應因子不同，簡單地說就是化合物在檢測器的響應不呈線性，或者線性範圍比較窄。選擇合適的定量方法時，除需要考慮是相對定量還是絕對定量外，同時需要考察化合物的線性響應範圍、是否有合適內(nei) 標、是否有標準品等。接下來就主要介紹下色譜分析中常用的幾種定量方法。
1.歸一化法
由於(yu) 組分的量與(yu) 其峰麵積成正比，如果樣品中所有組分都能產(chan) 生信號，得到相應的色譜峰，那麽(me) 可以用如下歸一化公式計算各組分的含量。
若樣品中各組分的校正因子相近，可將校正因子消去，直接用峰麵積歸一化進行計算。中國藥典用不加校正因子的麵積歸一化法測定藥物中各雜質及雜質的總量限度。
優(you) 點：簡便、準確、定量結果與(yu) 進樣量重複性無關(guan) (在色譜柱不超載的範圍內(nei) )、操作條件略有變化時對結果影響較小。
缺點：必須所有組分在一個(ge) 分析周期內(nei) 都流出色譜柱，而且檢測器對它們(men) 都產(chan) 生信號。不適於(yu) 微量雜質的含量測定。
2、外標法
用待測組分的純品作對照物質，以對照物質和樣品中待測組分的響應信號相比較進行定量的方法稱為(wei) 外標法。此法可分為(wei) 工作曲線法及外標一點法等。
工作曲線法是用對照物質配製一係列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率、截距。在完全相同的條件下，準確進樣與(yu) 對照品溶液相同體(ti) 積的樣品溶液，根據待測組分的信號，從(cong) 標準曲線上查出其濃度，或用回歸方程計算，工作曲線法也可以用外標二點法代替。通常截距應為(wei) 零，若不等於(yu) 零說明存在係統誤差。工作曲線的截距為(wei) 零時，可用外標一點法(直接比較法)定量。
外標一點法是用一種濃度的對照品溶液對比測定樣品溶液中i組分的含量。將對照品溶液與(yu) 樣品溶液在相同條件下多次進樣，測得峰麵積的平均值，用下式計算樣品中i組分的量：
Wi=AiWs/As
式中Wi與(yu) Ai分別代表在樣品溶液進樣體(ti) 積中所含i組分的重量及相應的峰麵積。Ws及As分別代表在對照品溶液進樣體(ti) 積中含純品i組分的重量及相應峰麵積。
優(you) 點：簡便，不需用校正因子，不論樣品中其他組分是否出峰，均可對待測組分定量。
缺點：此法的準確性受進樣重複性和實驗條件穩定性的影響。
此外，為(wei) 了降低外標一點法的實驗誤差，應盡量使配製的對照品溶液的濃度與(yu) 樣品中組分的濃度相近。
3、內(nei) 標法
選擇樣品中不含有的純物質作為(wei) 對照物質加入待測樣品溶液中，以待測組分和對照物質的響應信號對比，測定待測組分含量的方法稱為(wei) 內(nei) 標法。“內(nei) 標”的由來是因為(wei) 標準(對照)物質加入到樣品中，有別於(yu) 外標法。該對照物質稱為(wei) 內(nei) 標物。
在一個(ge) 分析周期內(nei) 不是所有組分都能流出色譜柱(如有難氣化組分)，或檢測器不能對每個(ge) 組分都產(chan) 生信號，或隻需測定混合物中某幾個(ge) 組分的含量時，可采用內(nei) 標法。
準確稱量W克樣品，再準確稱量Ws克內(nei) 標物，加入至樣品中，混勻，進樣。測量待測組